fun88手机版一个多机闭域的构架卵白摘要摘要 Ａｘｉｎ是，影响安排分歧 的信号通道它能通过与分歧卵白的彼此，ｃａｔｅｎｉｎ的降解下调Ｗｎｔ信号此中蕴涵Ａｘｉｎ能通过鼓舞１３．；化：Ａｘｉｎ也能通过ＨＩＰＫ２激活ｐ５３ 第４６位丝氨酸的磷酸化同源二聚 化的Ａｘｉｎ能通过ＭＥＫＫｌ或ＭＥＫＫ４激活ＪＮＫ磷酸；］ＪＩｌＳｍａｄ７的降解 加强ＴＧＦ．ｐ信号等迩来的探讨察觉Ａｘｉｎ还能通过Ａｒｋａｄｉａ增。发育、箝制肿 瘤产生、插足细胞骨架重排等经过Ａｘｉｎ通过对分歧信号的安排插足调控生物个人。ｕｓｅｄ（Ｆｕ）基因编码鼠源Ａｘｉｎ是由鼠的Ｆ；转座子ＩＡＰ的插入形成的ＡｘｉｎＦｕ等位基因是由。 经管分叉和分歧水准尾巴卷曲等百般表型ＡｘｉｎＦ岍ｕ幼鼠会呈现胚胎致死、神。检测到 了截短的ＡｘｉｎｍＲＮＡ目前的探讨正在ＡｘｉｎＦ“幼鼠体内，突变卵白的报道但并没有相干。 实生存Ａｘｉｎ的突变卵白Ａｘｉｎｎ幼鼠体内是不是真，于Ａｘｉｎ突变的卵白的生存 惹起的Ａｘｉｎｖｕ幼鼠的的表型是不是由，果是如，的途径惹起的又是通过奈何，前还不领会这些问问题。学和分子生物学的措施本论文 通过生物化，生存及其正在生 物体内的紧急效力体例地阐领会Ａｘｉｎ突变卵白的。ｕ幼鼠体内确实生存 Ａｘｉｎ截短的突变体本论文最初用免疫重淀的措施说明ＡＸｉｎＦ。ｎ第１－５９６个氨基酸该突变体只蕴涵Ａｘｉ，Ａｘｉｎ卧ＮＴ将其定名为 。ＯＰＦＬＡＳＨ的转录活性：与Ｗｎｔ信号的苛重安排因子的免疫共重淀实行显示实行的探讨察觉ＡｘｉｎＦｕ州可能像野生型Ａｘｉｎ雷同下调ＬＥＦ．１和 Ｔ，ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的降解复合体Ａｘｉｎｌ：ｕ－ＮＴ能有用变成；ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的靶向基［］ｂｏｚ和ｔｂｘ６都受到了相仿水准的下 调通过Ａｘｉｎ和ＡｘｉｎＦｕ－ＮＴｍＲＮＡ的斑马 鱼胚胎打针实行也参观到。ｔ信号的安排与Ａｘｉｎ没有昭着的不同这些评释Ａｘｉｎ９ｕ－Ｎ１‘对Ｗｎ。Ｋ（这可以与ＡｘｉｎＦ“州缺失ＴＡｘｉｎ的Ｃ端有 闭）本论文正在探讨 经过中还察觉ＡｘｉｎＦｕ椰不只不行激活刷，Ａｘｉｎ激活ＪＮＫ还能热烈抑审ＪＪ。棚生存变成同源二 聚化的机闭域进一步的探讨察觉ＡｘｉｎＦｕ，损害Ａｘｉｎ变成同源二聚体ＡｘｉｎＦ郴通过该机闭域能，ｘｉｎ激活ＪＮＫ的影响从而起到抑 错ｌＪＡ；ｉｎ与ＭＥＫＫＩ或ＭＥＫＫ４贯串而Ｆ［Ａｘｉｎ陆Ｎ１能逐鹿Ａｘ，ｘｉｎ激活ＪＮＫ的另一分子机制这 可以是ＡｘｉｎＦｕ栅箝制Ａ。说明ＴＡｘｉｎＦ州１能箝制Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ和ＪＮＫ信号正在斑马鱼体内检钡ｑＡｘｉｎＦ“幼盯 的生物学效力的实行也，腹部化的表型从而取得了 。Ｎ１对ｐ５３磷酸化的影响本论文还检测ＹＡｘｉｎ卧。录活性但能热烈箝制Ａｘｉｎ加强的ｐ５３一ｌｕｃ的转录活性实行的探讨察觉 ＡｘｉｎＦｕ制１不影响ｐ５３．１ｕＣ的转；ｉｎｈ．Ｎ１’缺失了ＨＩＰＫ２的贯串域相闭）但能热烈抑常ＪＪＡｘｉｎ鼓舞ｐ５３第４６位丝氨 酸的磷酸化ｐ５３磷酸化的实行也说明ＴＡｘｉｎＦｕ刑‘不行加强ｐ５３第４６位丝氨酸的磷酸化（这可以 摘要 与Ａｘ。合区域的突变体ＡｘｉｎＦ“ＡｘｉｎＦｕ椰缺失ｐ５３结。ｐ５３第４６位丝氨酸的磷酸化影响ＮＴＭＩＤ不滋扰Ａｘｉｎ鼓舞 。此因，能竞 争Ａｘｉｎ与ｐ５３贯串可以是Ａｘｉｎ５州ａｘｉｎＦｕ－ＮＴ不行与ＨＩＰＫ２彼此影响但。６位丝氨酸的磷酸化影响 的分子机制１抑带１］Ａｘｉｎ鼓舞ｐ５３第４。一概的是与此相，通过鼓舞ｐ５３磷酸化惹起的 细胞凋亡ＡｘｉｎＦｕ刑１能抑隹ｊ１］Ａｘｉｎ。之总，ｎＦｕＡｘｉ。信号通道中的紧急安排影响Ｎ１影响了Ａｘｉｎ正在多条，耐多条信号通道安排受到影响的配合影响结果ＡｘｉｎＦｕ 幼鼠的表型可以是ＡＸｉＩ。Ａｘｉｎ闭节词：；Ｆｕ－ＮＴＡｘｉｎ；：ＪＨＫＷｎｔ；５３ｐ；ｌｔｉｄｏｍｉａｎｓｃａｆｆｏｌｄ ｐｒｏｔｅｉｎＴＧＦ．ｐ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａｘｉｎｉｓ ａｍｕ， ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ．Ａｘｉｎ Ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕａｌｔｅＷｎｔ ｓｉｇｎａｌｉｎｇｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｍａｎｙｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔ；ｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ＭＥＫＫｌｏｒＭＥＫＫ４ｈｏｍｏｄｉｍｅｒｉｅ ＡｘｉｎＣａｎｉｎｄｕｃｅＪＮＫ ａ；ｏｎ Ｓｅｒ４６．ＴｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｍｕｌｔｉｐｌｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓＡｘｉｎＣａｎａｌｓｏ ｕｐ—ｒｅｇｕｌａｔｅＨＩＰＫ２－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉ， ｒｏｌｅｓｉｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＡｘｉｎ ｐｌａｙｓｉｍｐｏｒｔａｎｔ，ｔｕｍｏｒｇｅｎｅｓｉｓｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ，ｎｔｉｆｉｅｄｆｒｏｍｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ ｔｈｅｍｏｕｓｅ Ｆｕｓｅｄ（Ｆｕ）ｌｏｃｕｓｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ａｎｄＳＯｏｎ．Ａｘｉｎｗａｓ ｏｒｉｇｉｎａｌｌｙ ｌｄｅ；ｒｏｍ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｌｅｔｈａｌｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｎｏｒｍａｌａｄｕｌｔｈｏｏｄｗｉｔｈ ｋｉｎｋｙ ｔａｉｌｓ．ＡｂｅｒｒａｎｔｍＲＮＡ ｓｐｅｃｉｅｓ ＡｘｉｎｆｒｏｍＡｘｉｎｔｈｅ Ａｘｉｎｎａｌｌｅｌｅｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｔｈｅｉｎｓｅｒｔｉｏｎｏｆａｌｌｌＡＰｔｒａｎｓｐｏｓｏｎ．Ａｘｉｎ ｍｉｃｅｄｉｓｐｌａｙｖａｒｙｉｎｇｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｒａｎｇｉｎｇ ｆ。ｏｕｓｌｙｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ“ｍｏｕｓｅｗａｓｐｒｅｖｉ；ｌｅａｒ ｈｏｗｔｈｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ ｏｆＡｘｉｎｈｍｏｕｓｅａｒｅｃａｕｓｅｄ ｔｈｅｍｕｔａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｉｎ ｔｈｅｓｉｓｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｍｕｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔ（ｓ）ｈａｄ ｂｅｅｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ．Ｉｎ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｉｔ Ｗａｓｕｎｃ，ｓ．Ｔｈｅｍｕｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｔｒｕｎｃａｔｅｄＡｘｉｎｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ１－５９６．ｗｈｉｃｈｉｓ ｄｅｓｉｇｎａｔｅｄ ａｓＡｘｉｎＦｕ艄．Ｗｈｅｎｔｅｓｔｅｄｆｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎｔｈｅＡｘｉｎｍｕｔａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎｕｓｉｎｇ ｂｒａｉｎｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍＡｘｉｎ５ｕｍｉｃｅ谢ｍ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅ，ｏｎ ｋｅｙＷｎｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ１３－ｃａｔｅｎｉｎ ｔａｒｇｅｔ ｇｅｎｅｓ ｚｅｂｒａｆｉｓｈｅｍｂｒｙｏｓ．ＨｏｗｅｖｅｒＡｘｉｎ８“荆Ｔ ｗａｓｆｏｕｎｄｔｏ ａｂｏｌｉｓｈ Ａｘｉｎ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＪＮＫＡｘｉｎＦ“艄ｅｘｈｉｂｉｔｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＷｎｔ ｓｉｇｎａｌｉｎｇｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈｗｉｌｄ ｔｙｐｅ Ａｘｉｎａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ＬＥＦｏｒＴＯＰＦＬＡＳＨｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅａｓｓａｙ ｉｎｔｅｒａｃｔｉ，ｇ．Ｔｏｇｅｔｈｅｒ ＧＳＴｐｕｌｌ－ｄｏｗｎ ａｓｓａｙｉｔ Ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ＡｘｉｎＦｕｗｈｉｃｈｐｌａｙｓ ａｃｒｉｔｉｃａｌｒｏｌｅｉｎｄｏｒｓｏｖｅｎｔｒａｌ ｐａｔｔｅｒｎｉｎ。ｎａｎｄＣａｎｆｏｒｍａｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｃｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈ ｗｉｌｄｔｙｐｅＡｘｉｎＮＴｃｏｎｔａｉｎｓ ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙｕｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｄｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎｄｏｍａｉ； ｅｍｂｒｙｏｓｂｙ ａｎｔａｇｏｎｉｚｉｎｇ ＪＮＫａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｉｎｔｈｅｓａｍｅ ｓｔｕｄｙｉｔ ＷａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔＡｘｉｎＦ幼ＮＴｗｈｉｃｈ ｃａｌｌｉｎｔｅｒａｃｔｗｉｔｈ ｐ５３ ｂｕｔｎｏｔ ＨＩＰＫ２ｉｔ ＷａｓａｌｓｏｆｏｕｎｄｔｈａｔＡｘｉｎＦｕ幼ｒｒＣａｎ ｃｏｍｐｅｔｅ ｗｉｔｈＡｘｉｎｉｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ＭＥＫＫＩｏｒＭＥＫＫ４．ＣｏｎｓｉｓｔｅｎｔｌｙＡｘｉｎＦ“郴ｃａｎ ｖｅｎｔｒａｌｉｚｅｚｅｂｒａｆｉｓｈ，ｐｈｏｓｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｐ５３ａｔＳｅｒ４６Ｃａｌｌ ｉｎｈｉｂｉｔＡｘｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ，Ｆ州ＴＡＭＩＤｂｕｔＡｘｉｎ，ｔｓ ｐ５３ｂｉｎｄｉｎｇｄｏｍａｉｎｗｈｉｃｈＷａｓｄｅｌｅｔｅｄｏｆｉ，ｅｎｔｌｙＡｘｉｎ５“岍Ｃａｎ ａｂｏｌｉｓｈ Ａｘｉｎ．ｍｅｄｉａｔｅｄｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＩｎｓｕｍｍａｒｙＡｘｉｎＦｕ‘ＮＴ ｃａｎｄｏｍｉｎａｎｔｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ａｆｆｅｃｔ ｔｈｅ如ｎｃｔｉｏｎｏｆＡｘｉｎｉｎ ｍａｎｙｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓｈａｓｒｉｏ ＡｂｓｔｒａｃｔｅｆｉｅｃｔｏｎＡｘｉｎ．ｉｎｄｕｃｅｄ ｐｈｏｓｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｐ５３Ｓｅｒ４６．Ｉｔ＇ｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔＡｘｉｎＦ幼Ｍｃａｎ ａｔｔｅｎｕａｔｅ ｐ５３ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｂｙｓｅｑｕｅｓｔｅｒｉｎｇｐ５３．Ｃｏｎｓｉｓｔ，ｔｉｏｎ ｏｆｍｏｒｅｔｈａｎｏｎｅ ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｘｉｎａｎｄ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆＡｘｉａｌｕｍｉｃｅ ｍａｙ ｂｅｃａｕｓｅｄｂｙｐｅｒｔｕｒｂａ；ｕ－Ｎ＇ｒＡｘｉｎＦ；ｎｔＷ；ＮＫＪ；５３ｐ；计谋………………………………………………６０ 图３．１：ｌＡＰ收支可以呈现的Ａｘｉｎ突变的卵白产品…………………………… ６４图３．２：Ｃ２ｂ和ＣＴ３６抗体的判决…………………………………………………”６５ 图３．３：Ａｘｉｎ９ｕ幼鼠体内生存ＡｘｉｎＦｕ艄的卵白突变体……………………………６６ 图３．４：Ａｘｉｎ盹幼鼠基因型的判决…………………………………………………６７ 图３．５：ＡｘｉｎＦ州Ｔ箝制ＴＯＰＦＬＡＳＨ的转录活性…………………………………．．６７ 图３．６：ＡｘｉｎＦ”州’箝制ＬＥＦ．１的转录活性…………………………………………６８ 图３．７：ＡｘｉｎＦ＊Ｍ与ＧＳＫ．３Ｄ彼此影响……………………………………………６９ 图３．８：ＡｘｉｎＦｕ州与１３－ｃａｔｅｎｉｎ彼此影响……………………………………………６９ 图３．９：Ａｘｉｎ阻ＮＴ与ＡＰＣ彼此影响…………………………………………………６９ 图３．１０：Ａｘｉｎ卧ＮＴ与ＣＫＩｃｘ彼此影响…………………………………………… ７０图３．１１：ＡｘｉｎＦ”刑Ｔ箝制母源１３－ｃａｔｅｎｉｎ靶向基因的表达…………………………７０ 图３．１２：ＡｘｉｎＦｕ图表索弓 图表索引 图１．１：ＡｘｉｎＦｕ幼鼠尾巴分歧水准卷曲的表型…………………………………… 图１．２：Ａｘｉｎ正在Ｗｎｔ信号通道和ＪＮＫ信号通道中的影响…………………………８图１．３：Ａｘｉｎ彼此影响的卵白及其正在Ａｘｉｎ的影响区域………………………… １０ 图１．４：Ａｘｉｎ是ｐ５３活化复合体的构架卵白………………………………………２０ 图１．５：Ａｘｉｎ正在ＴＧＦ．ｐ信号通道中的影响……………………………………… ２３图１．６：Ｗｎｔ信号通道……………………………………………………………… ２６ 图２．１：ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋／－）载体示妄图……………………………………………４２ 图２．２：ｐＣＭＶ５载体示妄图……：…………………………………………………”４３ 图２．３：ｐＧＥＸ载体示妄图……………………………………………………………４３ 表２．１：本论文运用抗体及开头一览表…………………………………………… ５３ 表２．２：免疫新西兰兔的光阴、剂量和式样………………………………………５６ 表２．３：合成ｍＲＮＡ所用质粒及相应计谋……………………………………… ５８表２．４：合成探针所用的质粒和。ＪＮＫ……………………………………………７５ ＡｘｉｎＦｕ－ＮＴ的缺失突变体较弱地箝制Ａｘｉｎ激活ＪＮＫ……………………７５ Ａｘｉｎ８ｕ加’和ＭＥＫＫｌ彼此影响…………………………………………一７６ ＡｘｉｎＦ幼ＮＴ逐鹿Ａｘｉｎ贯串ＭＥＫＫｌ．………………………………………７７ ＡｘｉｎＦ椰和ＭＥＫＫ４彼此影响…………………………………………“７７ Ａｘｉｎ系列缺失突变体与ＭＥＫＫ４的彼此影响………………………… ７８ Ａｘｉｎｒ”抓逐鹿Ａｘｉｎ贯串ＭＥＫＫ４．………………………………………７９ 打针胚胎中背部中胚层象征卵白ｇｏｏｓｅｃｏｉｄ的表达散布………………８０ 打针胚胎中腹部边沿象征卵白ｅｖｅｌ的表达散布………………………８ｌ Ａｘｉｎ卧ＮＴ箝制Ａｘｉｎ诱导的ｐ５３一ｌｕｃ的转录活性………………………．．８１ ＡｘｉｎＦｕ－ＮＴ箝制Ａｘｉｎ加强ｐ５３Ｓｅｒ４６的磷酸化…………………………一８２ Ａｘｉｎ’ｕＮＴ箝制母源１３－ｃａｔｅｎｉｎ靶向基因表达的胚胎打针统计数据……．７１ 图３．１３：ＡｘｉｎＦ”椰免疫共重淀Ａｘｉｎ………………………………：………………．７１ 图３．１４：Ｍｙｃ．ＡｘｉｎＦ州Ｔ免疫共重淀ＨＡ．ＡｘｉｎＦ州………………………………．．７２ 图３．１５：ＨＡ．ＡｘｉｎＦｕ州免疫共重淀Ｍｙｃ．ＡｘｉｎＦｕ‘ＮＴ………………………………．．７２ 图表索引 图３．１６： 图３．１７： 图３．１８： 图３．１９： 图３．２０： 图３．２１： 图３．２２： 图３．２３： 图３．２４： 图３．２５： 图３．２６： 图３．２７： 图３．２８： 图３．２９： 图３．３０： 图３．３１： 图３．３２： 图３．３６： Ａｘｉｎ系列缺失突变体与ＡｘｉｎＦｕ州的彼此影响…………………………７３ ＧＳＴ．ＡｘｉｎＮＴ４００交融卵白的ｐｕｌｌ．ｄｏｗｎＡｘｉｎ和ＡｘｉｎＦｕ州……………．７４ ＡｘｉＩｌＦｕ堋’箝制Ａｘｉｎ激活。５３彼此影响ＮＴ能与ｐ。ＡｘｉｎＦ“－ＮＴ不与ＨＩＰＫ２彼此影响…………………………………………一８３ 。…………………８４ Ａｘｉｎ９州箝制Ａｘｉｎ诱导的细胞凋亡……………………………………８４ ＡｘｉｎＦｕ………………………………………．８３ ＡｘｉｎＦ“制ＴＡＭＩＤ不影响Ａｘｉｎ加强ｐ５３Ｓｅｒ４６的磷酸化。ａｃｔｉｖａｔｅｄＳＴＡＴ 长终端反复序列 丝裂原激活的卵白激酶 多克隆位点 鼠胚胎纤维原细胞 ＭＥＫ激酶 ＭＥＫＫｌ贯串区域 分钟 毫升 毫摩尔 磷酸缓冲液 聚醚酰亚胺 活化ＳＴＡＴ卵白箝制因子 ＰＫＣ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅＣ 卵白激酶Ｃ ＰＰ２Ａ ｐｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ２Ａ 卵白磷酸酶２Ａ ＲＧＳ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｏｆＧ—ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｇ卵白信号调控因子 Ｒｐｍ ｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎｓ ｐｅｒ ｍｉｎｕｔｅ 转数／分 ｓｉＲＮＡｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ 幼分子滋扰ＲＮＡ ＳＵＭＯ ｓｍａｌｌ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ－ｒｅｌａｔｅｄ ｍｏｄｉｆｉｅｒ 幼泛素相干化妆子 ＴＧＦ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ 转化孕育因子 ＴＧＦｌ３Ｒ ＴＧＦＩＢｒｅｃｅｐｔｏｒ ＴＧＦＩＢ受体 ＴＮＦ ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ 肿瘤坏死因子 ｖｏｌｔｓ伏特 ｌＩＯ－厦门大学学位论文原创性声明 自己呈交的学位论文是自己正在导师指引下ＮＴ惹起腹部化影响的形式图……………………………………８８ ．１０７． 缩略语及中英文比照 缩略语及中英文比照 ．１０８． 缩略语及中英文比照 ．１０９． 缩略语及中英文比照 缩略语及中英文比照（续２） 缩写 全称（英文） 全称（中文） ＬＥＦ／ＴＣＦ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｅｎｈａｎｃｅｆａｃｔｏｒ／Ｔｃｅｌｌ 淋巴加强因子厂ｒ细胞因子 ＬＴＲ 队ＰＫ ＭＣＳ ＭＥＦｃｅｌｌ ＭＥＫＫ ＭＩＤ ｍｌｎ ｍＬ ｍＭ ｆａｃｔｏｒ ｌｏｎｇ ｔｅｒｍｉｎａｌ ｒｅｐｅａｔ ｍｉｔｏｇｅｎ—ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ ｍｕｌｔｉｐｌｅｃｌｏｎｉｎｇ ｓｉｔｅｓ ｍｕｒｉｎｅ ｅｍｂ巧ｏｍｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｅｌｌ ＭＥＫｋｉｎａｓｅ ＭＥＫＫｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｄｏｍｍｎ ｍｉｎｕｔｅ ｍｉｌｌｉｌｉｔｅｒ ｍｉｌｉｍｏｌａｒ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ＰＢＳ ＰＥＩ ＰＩＡＳ ｓａｌｉｎｅｂｕｆｆｅｒ ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆ ，探讨成 果独立落成的。人或全体仍旧发表的探讨效率自己正在论文写作中参考其他个，当式样清楚标明均 正在文中以适，究生学 术运动标准（试行）》并吻合公法标准和《厦门大学研。表另，论文为（该学位。天堂乐fun88组） 的探讨效率韵渥裂 ）课题（，经费或实行室的 资助取得（ ）课题（组），实行室落成正在（ ）。或课题组控制人或实行室名称（请正在以上括号内填写课 题，声明实质的未有此项，特 别声明可能不作。学凭据《中华群多共和国粹位条例暂行实行办 法》等划定保存和运用此学位论文） 声明人（署名）：艿晦 厦门大学学位论文著述权运用声明自己应承厦门大，学位论文（蕴涵纸质版和电子版）并向主管部分或其指定机构送交 ，书 馆及其数据库被查阅、借阅准许学位论文进入厦门大学图。士、硕士学位论文共修单元数据库举办检索自己应承厦门大学将学位论文参预全国 博，和 摘要汇编出书将学位论文的题目，它式样合理复制学位论文采用影印、缩印或者其。（＼／）２．不保密本学位论文属于： ，述授权实用上。打“”或填上相应实质（请正在以上相应括号内。学保密委员会核定过的学位论文保密学位论文 应是仍旧厦门大，定的学位论文均为公然学位论文未经厦门大学保密 委员会审。不填写的此声明栏，开学位论文默认 为公，上述授权均实用。究希望 １．１．１幼引 Ａｘｉｎ最早是做为鼠的ｆｕｓｅｄ基因产品被判决） 声明人（署名）：艿防 第一章绪言第一章绪言 １．１ Ａｘｉｎ的研。可 以箝制背部体轴的变成【ｌＪ正在蛙的胚胎中过量表达Ａｘｉｎ，胚胎发育经过中会出 现双体轴的形象而ｆｕｓｅｄ基因突变的纯合子幼鼠正在，发育经过中对体轴的变成至闭重 要这些探讨察觉评释Ａｘｉｎ正在胚胎。卵白秤谌影响Ｗｎｔ信号通 道从而对体轴发育起负调控的影响目前的探讨察觉Ａｘｉｎ是通过安排细胞中Ｄ．ｃｍｅｍｎ的。些清楚鉴于这，果蝇的“ｆｕｓｅｄ”基因相混杂同时也为了避免与之不相干 的，ｘｉｎ（ａｘｉｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）人们将哺乳动物的ｆｕｓｅｄ基因更名为Ａ。究的深远跟着研，、Ｋ通 道和ｐ５３等信号通道中起这紧急的影响察觉Ａｘｉｎ起码正在Ｗｎｔ信号、ＴＧＦ．ｐ信号。（也称Ａｘｉｎ）【２】和Ａｘｉｎ２（或称 Ａｘｉｌ、Ｃｏｎｄｕｃｔｉｎ）１３１１．１．２Ａｘｉｎ基因 目前的探讨以为Ａｘｉｎ家族有两个同源卵白Ａｘｉｌｌｌ。１６ｑ１３．３和１７ｑ２３．２４人类这两个编码基因分辩位于染色体，ｌＯ个表显子ｃＤＮＡ都含；ｉｎａ和Ａｘｉｎｂ两种卵白质Ａｘｉｎ基因又可能编码Ａｘ，显子编码个人的Ｎ端多出了３６个氨基酸Ａｘｉｎａ 匕ＬＡｘｉｎｂ正在第８表，正在还不清 楚但其效力现。大鼠和人的进化上是高度守旧的【１４５ＪＡｘｉｎ正在果蝇、非洲爪蟾、鸡、幼鼠、。ｘｉｎ的同源基因ＰＲＹ．１迩来正在正在秀丽线虫又察觉Ａ，ｎ正在效力上具 形似性探讨说明它与Ａｘｉ。和肿瘤产生中紧急的调控影响是相 对应的Ａｘｉｎ正在结构中的普及表达与它正在发育。ｉｎ是一个多机闭域的卵白目前的探讨仍旧很领会Ａｘ，卵白 彼此影响它可能和良多。Ａｘｉｎ是散布正在细胞质中的对平常的表皮细胞染色察觉，布于细胞核中或细胞核中和细胞膜上【６ｌ但正在腺癌和很 多肿瘤细胞＠Ａｘｉｎ是分。中绝大个人是散布于细胞核中而Ａｘｉｎ２正在平常 的结构，会个人转化到 细胞质中［７１但正在息肉和癌结构中Ａｘｉｎ２。ｉｎ２两分子很形似Ａｘｉｎｌ和Ａｘ， 明它们可以施行着分歧的生物学效力但它们正在细胞内的散布的纷歧致性说。于正在发育经过的紧急影响和该基因突变不时表示出来的异 第一章前１．１．３ＡｘｉｎＦ”幼鼠的探讨希望 幼鼠ｆｕｓｅｄ基缘由；于转座ＩＡＰ（ｉｎｓｔｒａｃｉｓｔｅｍａｌ ｐａｒｔｉｃｌｅ）插入到第六个表显子Ｆ游的第３５碱基处科柬谭－ｗ础ｒ１ｄＲ＾ｍａｌＧｅｎｅｓｉｓ２００６Ｖａｓｉｃｅｋ等人的探讨察觉Ａｘｉｎｌ“突变是ｍ，子内形成的』ｌ”即正在第六个内舍。的ｍＲＮＡ的本质探讨察觉对 Ａｘｉｎ“转录出来，应的 ３．９ ｋｂｍＲＮＡ．这评释ＩＡＰ的插入没有影响哞＝部的ＡｘｉｎｍＲＮＡ正在第六个和第七个 表显了之间的精确剪切正在野生型和纯合亍ｆｆ々Ａｘｉｎ“幼鼠的大 脑、肝脏、肾脏和脾脏抽提的ＲＮＡ中均能榆测到与野生型Ａｘｉｎ的ｍＲＮＡ相对。显子６、７和８片ｊ探针遮盖表，样显示了野生型Ａｘｉｎ的转录ＲＮａｓｅ爱惜实行的结 果同，表另，ＮＡ和只蕴涵第七和第十个表显子的ｍＲＮＡ还检测到了只蕴涵到第六个表显子的 ｍＲ，表的转录式样 【１５ｌ这评释Ａｘｉｎ生存另。能生存一个由表显子１－６编码的卵白 产品只包台到第７、个表显子ｍＲＮＡ预示这可。个表显子的ｍＲＮＡ而只蕴涵第七和第十，一个内正在的启 动子评释ｌＡＰ可以供应，ＡｘｉｎＣ端的转录产品该启动子可以形成编码。ｏｒｔｈｅｍ实行 措施运用ｐｏｌｙ（Ａ）＋Ｎ，ＲＮＡ上检测到了２ｋｂ的条 第一章绪言 带用第六个内台子的特异探针只正在有表型的幼鼠ｍ，ｌ ｒｅｐｅａｔ）初阶蕴涵第七个到 第十个表显子的全长相一概这条带的巨细正好和预期的从ＬＴＲ（１０ｎｇ ｔｅｒｍｉｎａ。ＮＡｅｎｄｓ）措施扩增的取得的ＰＣＲ产品测序剖判察觉这些产品 都是从ＬＴＲ下游的第六内含子的四个启始位点启始的用ＲＬＭ．ＲＡＣＥ（５’ＲＮＡｌｉｇａｓｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄｒａｐｉｄ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆｃＤ。阅读框和Ａｘｉｎ是纷歧致的这四个启始位点有两个的 ，录３９氨基酸的多肽其余一个是只可转，致的并能表达蕴涵第七到第十个表显子全长的产品唯有第四个启 始位点的阅读框和Ａｘｉｎ是一。明翻译只可从第四个启始位点初阶体表真核生物的转录翻译实行也证，变就不行取得翻译产品【１６１要是第四 个启始位点产生突。六个表显子区域被高度甲基化的Ａｘｉｎ５ｕ／＋ｉｘ鼠是没有突 变表型的Ｒａｋｙａｎ等人闭于正在ＬＴＲ处的ＤＮＡ 甲基化的探讨显示ＬＴＲ－第，／＋正在该区域则相对的去甲基化而有突变表型的Ａｘｉｎ’ｕ；甲基化或是永远未被甲基化的ＣｐＧ位点【１６１但他们也没正在 表型重静的幼鼠体内检测到永远。了ＬＴＲ．第六个表 显子区域的高度甲基化可能低落Ａｘｉｎ’ｕ／＋的表显率的通过 给ＡｘｉｎＦｕ／＋／ｊｘ鼠喂食含有甲基原料和辅助因子的物质实行也得出。影响ＬＴＲＦ勾可以的启动子的活性ｌｌ刀除了甲基化化妆可以也存 正在其他的化妆正在。端的Ａｘｉｎ会形成了双体轴正在非洲爪蟾体表里达缺失Ｎ ，机闭域的 ｍＲＮＡ也会呈现双体轴的形象【Ｉ】同样正在非洲爪蟾的腹部打针缺失Ａｘｉｎ的ＲＧＳ，ｉｎｎ幼鼠表型很形似这都和参观至ＵＡｘ。即是变成ＡｘｉｎＦｕ幼鼠尾巴卷曲的来源【１６】因而正在 ＩＡＰＬＴＲ邻近启始的极度转录很可以。４０年和１９８４年察觉的ＡｘｉｎＦｕ 的两个半显性等位基因【１８’１９１Ｋｉｎｋｙ（ＡｘｉｎＫｉ）和Ｋｎｏｂｂｌｙ（ＡｘｉｎＫｂ）分辩是正在１９。和ａｘｉｎＦｕ 相仿的骨骼极度的形象这两个等位基因的杂合子幼鼠也会呈现，的 Ａｘｉｎ鼬会正在胚胎的９．１０牺牲【１９２０】纯合子的Ａｘｉｎ鼬会正在胚胎的８．９天牺牲而纯合子；表此，胚胎也会呈现 个人或完全的双体轴机闭纯合的ＡｘｉｎＫｉ和ＡｘｉｎＦ”的，经过中起着紧急的 影响【９—９２０ｌ这些评释ｆｕｓｅｄ基因正在胚胎产生的。为止目前，等位基因ＡＸｉｎＴ９１【２ｎ还察觉ＴＡｘｉｎ鼬的其余一个，插入至Ｕｆｕｓｅｄ基因变成的突变它是由 ８．１ｋｂ的人￡．球卵白。他三个突变分歧于其，突变且不呈现尾巴卷曲的表型ＡｘｉｎＴ９１是 全隐性。的ＡｘｉｎＫｂ表 型是很难区另表纯合子的Ａｘｉｎ鼬表型和纯合子。ｓｅｄ基因产生取得效力性 突变变成的这评释显性的尾巴卷曲表型是因为ｆｕ，因产生牺牲效力性突变变成的而胚胎致死表型是因为该基。ｕｓｅｄ基因的染色体缺失幼鼠与此结 论相一概的是去除ｆ，ｎＫｉ和ＡｘｉｎＫｂ的胚胎致死形象［２２１正在杂合子时没有表型但它并不 能抵偿Ａｘｉ。野生型的ｆｕｓｅｄ基因拷贝但尾巴照样卷曲的而ＲＡｘｉｎＫ州＋三倍体幼鼠固然有两个 。基因可以表达某种突变的卵白这些都评释这三个显性等位，得新效力从而获。影响Ａｘｉｎ是个紧急的螭节因予４Ａｘｉｎ正在信号转导通道中的，的生物学效力施行良多紧急。Ｆ—Ｄ通道及ｐ５３等信号通道中都阐明着紧急影响正在Ｗｎｔ通道、 ＳＡＰＫＪＪ＇ＮＫ通道、ＴＧ，：Ａｘｉｎ正在Ｗｎ如图１ 同１．２！ｙｓ １．１ ４１ Ａｘｉｎ正在Ｗｎｔ信号通道中的影响 Ａｘｉｎ正在Ｗｎｔ信号通道中的影响Ｗｎｔ信号通道可能安排细胞的增嫡、瓦解及运动信号通道和ＪＮＫ信号通道中的影响Ｆｉｇ Ｉ．２：ＤｕａｌＦｕｎｃｔｉｏｎｏｆＡｘｉｎｉｎｔｈｅＷｒｉｔａｎｄＪＮＫ ｐａｔｈｗａ，变成都 币天紧急对个人发育及样子，胞皮相受体Ｆｒｉｚｚｌｅｄ进而激活 Ｄｖｌ其苛重经过为：渗出型Ｗｒｉｔ卵白影响于绌。一３Ｂ对Ｂ—ｃａｔｅｎｉｎ的磷酸化澈活的Ｄｖｌ可能箝制其Ｆ游ＧＳＫ，ｃａｔｅｎｉｎ的降解也就阻断了 ｔ３－，内与Ｔ细胞特 异凼九ＴｃＦ）等贯串进向诱导靶基凼转录Ｍ】如许Ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ就得以正在胞质内蕴蓄堆积并可能转化到核。集体生存于牛物体内的卵白Ａｘｉｎ是一种守旧的、。这个ｗｎｔｊ虚道Ｆ游效应分子秤谌的低沉它的高表达可导致 １３－ｃａｔｅｎｌｎ。道的箝制哨子行为ｗｎｔ通，的的多个分子产生影响Ａｘｉｎ与这条通道，、Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ、 Ｄｖｌ等这些分子蕴涵ＡＰＣ、ＧＳＫ．３８，通过调１并苛重，现它行为Ｗｎｔ通道箝制因子的 脚色肚ｃａｔｅｎｉｎ的磷酸化形态来实。ＯＳＫ．３Ｂ和ＡＰｃ贯串Ａｘｉｎｕｆ以直接－与，台体ＡＰＣ是三反复， 第一章绪言的成员之一Ａｘｉｎ．ＧＳＫ一邓。ａｔｅＩｌｉｎ举办有用安排１２４１唯有这三者变成复合体才可能对ｐ．ｃ。情状下正在平常，酸化继而经由泛素．卵白酶体途径被降 解１３－ｃａｔｅｎｉｎ被ＧＳＫ．３ｐ磷，平常细胞内的一个尽头低的浓度这确保了ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ正在。程受到了多个卵白的调控然则这个磷酸化的过 ，ｐ靠拢到必然水准时磷酸 化影响才会产生最初唯有当ｐ．ｃａｔｅｍｎ和ＧＳＫ．３，需求一个“场所”同时这种影响又，的构架卵白正在这里就起了重点影响ｆｌ而Ａｘｉｎ做为一个拥有多机闭 域，１２，ｘｉｎ的影响要是没有Ａ，ｔｅｎｉｎ阐明磷酸化影响【２６１ＧＳＫ－３１３无法对 ｐ．ｃａ。这样不光，ａｔｅｎｉｎ的磷酸化 影响表除了安排ＧＳＫ．３ｐ对ｐ．ｃ，３ｐ对其他底物的影响【２Ａｘｉｎ还可安排ＧＳＫ．，对其底 物的磷酸化影响稀少是加紧ＧＳＫ．３ｐ，如例，．３１３的ＡＰＣ磷酸化【２４１Ａｘｉｎ可能加紧依３１顷ＧＳＫ。．ｃａｔｅｎｉｎ的材干【２６１ＡＰＣ的磷 酸化降低了其贯串ｐ， ＧＳＫ．３ｐ磷酸化继而被降解的需要条款【２引而ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ与ＡＰＣ的贯串也是确保它被。被ＧＳＫ．３Ｄ磷酸化Ａｘｉｎ自身也可直接，ＳＫ－３１５和ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的贯串材干体表实行说明ＡＸｉｎ的磷酸化不影响它与Ｇ，化情势特别安静［２１酸化情势要比非磷酸。究以为也有研，贯串Ｄ．ｃａｔｅｍｎｔ２９Ｊ磷酸化的Ａｘｉｎ可能更有用的。输出因子ＣＲＭＩ的协 同助理下举办核质穿梭近来探讨注脚Ａｘｉｎ还可能正在Ｉ渤ＧＴＰ和，ｉｎ从细胞核内转出并将ｐ．ｃａｔｅｎ，箝制 剂普霉素Ｂ后由于正在运用ＣＲＭｌ，胞核内产生聚积Ａｘｉｎ正在细，ｔｅｎｉｎ也昭着升高细胞核内的Ｂ．ｃａ，则低沉【３０ｌ细 胞浆内的。ｎ可能穿梭进入细胞核【３１１统一光阴也有探讨注脚Ａｘｉ。正在细胞核内保留适宜的浓度拥有紧急道理这一 机制不光看待Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ，起肿瘤孕育箝制及肿瘤细胞产生凋亡的一种机制况且也是Ａｘｉｎ 正在用作肿瘤的基因诊疗时引。信号生存时当Ｗｎｔ，制ＧＳＫ．３Ｄ对 Ａｘｉｎ的磷酸化从而促使其降解Ｗｎｔ可能通过Ｄｖｌ对Ａｘｉｎ复合体的影响来抑，ｍｎ就可从复合体摆脱 【３２】失落ＴＡｘｉｎ的影响ｐ．ｃｍｅ。表另，ｖｌ将ＡｘｉｎＦ甸细胞膜转化探讨以为Ｗｎｔ信号可能使Ｄ，Ａｘｉｎ的秤谌【３３】而不是低落了细 胞Ｆ勺。究察觉另有研，负向安排ＡＰＣ秤谌但Ｗｎｔ信号箝制这曾经过一个由泛素．卵白酶体直接介导的通道可能 ，情势鼓舞这一 经过【３４ｉ而Ａｘｉｎ贝ＪＪ以寡聚体的。以看出：一方面从上面的探讨可，ｎｔ 通道箝制因子的名望：另一方面Ａｘｉｎ要通过各类举动加紧其行为Ｗ，到减弱Ａｘｉｎ箝制 影响的宗旨Ｗｎｔ信号则通过多种途径以达。影响 第一章绪言 Ａｘｉｎ是一个拥有多个效力机闭域的卵白１．１．４．１．２Ａｘｉｎ与Ｗｎｔ信号通道安排因子问的，互影响（图 １．３）能与良多卵白产生相。子彼此影响的结 图１．３：Ａｘｉｎ彼此影响的卵白及其正在ｈ它对Ｗｎｔ信号的安排也是通过跟一系列的Ｗｎｔ信号安排因。fun88官方网站首页。ｘｉｎａｎｄｔｈｅ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ｄｏｍａｉｎｓｏｎＡｘｉｎ １．１ｘｉｎ的影响区域Ｆｉｇ１．３：ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｗｉｔｈＡ。４。ｅｎｏｍａｔｏｕｓｐｏｌｙｐｏｓｉｓｃｏｌｉ１．２．１肿癯箝制因子肠腺息赘瘤卵白（ａｄ，ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｏｆＧ ｐｒｏｔｅｉｎｓｉｇｎａｌｉｎｇｆａｍｉｌｙＡＰＣ） Ａｘｉｎ与ＡＰＣ彼此影响的机闭域和Ｇ卵白信号家族的安排因子（，域是守旧的含Ｓｅｒ－Ａｌａ．Ｍｅｔ．Ｐｒｏ（ＳＡＭＰ）Ｉ拘２０个氨基酸的机闭域构成【３５】ＲＧＳ觚ｉｌｙ）拥有很高的同源性Ｂ２１．ＡＰＣ－与Ａｘｉｎ／Ｃｏｎｄｕｃｔｉｎ 的影响区。个ＳＡＭＰ反复序列ＡＰＣ基因含有三，突变机闭域的下游它们位于ＡＰＣ的。转录翻译正在突变机闭域处提前终止实行发 现良多肿瘤中ＡＰＣ的。ｌ为彼此影响正在箝制肿瘤产生中的紧急影响［３６３７ｌ这也评释了ＡＰＣ和 Ａｘｉｎ／Ｃｏｎｄｕｃｔｉｎ。．ｃａｔｅｎｉｎ产生彼此影响人们的探讨察觉 ＡＰＣ能与ｐ，胞核转化到细胞质的式样下调Ｂ．ｃａｔｅｆｌｉｎ的信号【３８’３９１而且通过填补ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的降解和将１３－ｅａｔｅｎｉｎ从细 。Ｃ）导致Ｄ—ｃａｔｅｎｉｎ信号的上调敲除果蝇中的ＡＰＣ基因 （Ｄ．ＡＰ，ｅｎｉｎ正在效力上的 彼此影响【４０１这就进一步确定了ＡＰＣ和ｐ．ｃａｔ。ｎｉｎ民１］Ａｒｍａｄｉｌｌｏ实行说明低落果蝇的ｐ．ｃａｔｅ，突变制 成的缺陷表型可能光复Ｄ．ＡＰＣ；也会呈现相仿于Ｄ．ＡＰＣ失活的表型同样Ａｒｍａｄｉｌｌｏ的过量表达。ｉｎ是需求Ａｘｉｎ插足的ＡＰＣ下调Ｂ．ｃａｔｅｎ。ＧＳＫ．３Ｄ对１３．ｃａｔｅｎｉｎ的磷酸化实行说明ＡＰＣ和Ａｘｉｎ变成复合体有助于 ，Ｉｌｉｎ接着就会被降解１４被磷酸化的ｐ．ｃ ａｔＩ：。实上事，ｎ的降解是需求Ａｘｉｎ插足的ＡＰＣ诱导Ｂ．ｃａｔｅｎｉ。 容易被损害ＡＰＣ与Ａｘｉｎ的影响的身分导致失活Ｄ３Ｉ诱导ｐ．ｃａｔｅＩｌｉｎ降解的ＡＰＣ片断【４２】彳艮。能抑￥ＩＪＡＰＣ介导的ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的降解同样过量表达蕴涵ＲＧＳ机闭域 的Ａｘｉｎ片断。生突变Ｉ拘ＡＰＣ片断同样不行诱导Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎｌ拘降解一个Ａｘｉｎ贯串区域完全但 １３－ｃａｔｅｎｉｎ贯串区域发。此因，子的直接影响技能有用诱导Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ的降解ＡＰＣ 需求与Ａｘｉｎ和０．ｃａｔｅｎｉｎ两分。方 面另一，体也能降解ｐ—ｃａｔｅｎｉｎｔ３＇２４过量表达缺失了ＡＰＣ机闭域的心ｎ突变，４４５１２５４，两个正在ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ降解中起闭节 影响的卵白的完全贯串机闭域Ｍ这 第一章绪言 可以是该Ａｘｉｎ的突变体还保存着ＧＳＫ．３ｐ和Ｃ这。这样假使，ｎ正在缺失ＡＰＣ的情状下是不行填塞地安排细胞内ｐ—ｃａｔｅｎｉｎ 的秤谌的Ｄ．ｃａｔｅｌｌｉｎ正在ＳＷ４８０细胞中的极度堆 积评释内源表达的Ａｘｉ，ｘｉｎ能更有用地降解１３－ｃａｔｅｎｉｎ这也评释Ａｘｉｎ和ＡＰＣ的说合影响比Ａ。ｅｎｉｎ 正在平常细胞中无Ｗｎｔ信号时１．１．４．１．２．２ ｐ－ｃａｔ，ｄｈｅｒｉｎ）胞内肽段以及细胞内的０ｃ．ｃａｔｅｎｉｎ贯串胞质内ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ大个人与细胞膜上的钙粘卵白 （ｃａ，ｃｔｉｎ 上［４７４８］使之附着于细胞骨架卵白ａ，细胞间黏附介导同型；、 ＣＫｈｘ／ｅ和胞质卵白Ｄｉｖｅｒｓｉｎ贯串成多卵白复合体少个人与胞质ｒ勾ＡＰＣ卵白、ＧＳＫ．３ｃｔ／１３、Ａｘｉｎ，ｃａｔｅｎｉｎ、ＣＫＩｏｇｅ和Ｄｉｖｅｒｓｉｎ附着的支架此中Ａｘｉｎ和ＡＰＣ卵白供应一个 使ＧＳＫ．３ｐ、１３－。ａｄｉｌｌｏ是Ｗｒｌｔ信号通道中最紧急的调控因子【捌正在果蝇中的遗传学探讨证 明Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ／Ａｒｍ。性的突变会导致ｂ－ｃａｔｅｎｉｎ的上调经典的Ｗｎｔ信号中 各安排因子取得效力，致１３．ｃａｔｅｎｉｎ下调牺牲效力性的突变都将导 ，ｍ信号的决意影响【５０＇５１１这评释ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ对Ｗ。复的Ａｒｍａｄｉｌｌｏ反复机闭域１３－ｃａｔｅｎｉｎ含有１０重，ｎｉｎ与Ａｘｉｎ的贯串区域就正在ＧＳＫ．３Ｄ与Ａｘｉｎ的贯串区 域旁边它与Ａｘｉｎ的彼此影响域是第２ 到７个的反复机闭域：而ｐ．ｃａｔｅ。能同时和Ａｘｉｎ贯串变成三聚复合体ＧＳＫ．３ｐ与ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ。仅对ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的磷酸化【２该复合体能都增 强ＧＳＫ－３ｐ和Ｃ，２１５。接酶 １３－ＴｒＣＰ识别并进而被泛素化磷酸化的ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ可能被泛素连，白酶体的式样急速降解【５３１随后Ｄ．ＴｒＣＰＯｔ］以蛋。ｎ就保留正在低秤谌而不会有过多重积这 样细胞中游离ｐ．ｃａｔｅｎｉ。信号生存时当Ｗｒｉｔ，ｒｉｚｚｌｅｄｓ的胞表区贯串Ｗｎｔ卵白与７次跨膜卵白Ｆ， （ＬＲＰ５／６）协同影响下正在低密度脂卵白受体相干卵白，够将ＧＳＫ．ｐ磷酸化胞质中的Ｄｖｌ台皂，ｅｎｉｎ．ＧＳＫ一３ｐ上零落使其从 Ａｘｉｎ．ｐ．ｃａｔ，ｎｉｎ不行被降解因而ｐ．ｃａｔｅ， 正在胞质中荟萃并进而进入胞核内巨额游离的ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ。 ＴＣＦ／ＬＥＦ通过ＨＭＧ机闭域与ＤＮＡ贯串正在核内无Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ时与转录因子家族的，录活性被箝制ＤＮＡ的转。ＴＣＦ厂ｒＥＦ贯串变成复合体后１３－ｃａｔｅｎｉｎ进入核内与，箝制影响被废除ＴＣＦ／ＴＥＦ，活下游靶基因的转录特异地启动和激 。依赖ＧＳＫ３／ＣＫＩｃｔ磷酸化的式样降解实行探讨注脚Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ也能通过不。的Ｎ端相贯串后与Ｆ－ｂｏｘ卵白 第一章绪言 Ｅｂｉ变成复合物果蝇 基因ｓｉｎａ的哺乳动物同源物Ｓｉａｂ可能与泛素贯串酶，ｔｅｍｎ相贯串变成复合物尔后Ｅｂｉ可能与ｐ．ｃａ。当于 泛素连结酶Ｅｂｉ的影响就相，Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎｔ５４５５ｌ正在ｐ５３诱导的情状下可能降解。ａｔｅｎｉｎ的降解复合体从而加快ｐ．ｃａｔｅｍｎ的降解【５６】迩来的探讨注脚活化 的ｐ５３能鼓舞Ａ．ｘｉｎ更速地变成ｐ．ｃ。磷酸化依赖的式样鼓舞ｐ．ｃａｔｅｍｎ 的降解这些探讨也评释Ａｘｉｎ可能通过磷酸化依赖和非。ｃｏｇｅｎｓｙｎｔｈａｓｅ ｋｉｎａｓｅ３１．１．４．１．２．３糖原合成激酶（ｇｌｙ，卵白分辩是ＧＳＫ．３ａ和ＧＳＫ．３ＤＧＳＫ－３） ＧＳＫ．３有两个同源。学效力的紧急丝氨酸／苏氨酸激酶它是一种正在细胞内安排很 多生物。合 成酶的激酶类被察觉和离别的早先是行为一种能磷酸化失活糖原。着良多的细胞事变的产生ＧＳＫ．３的活性影响，因子的化妆和体轴发育等【２６＇５７５８１这 此中蕴涵糖原的代谢、微管的运动、转录。氨基酸３５３．４３７产生彼此影响【２】实行 ｉｔＮＧＳＫ．３Ｄ能与Ａｘｉｎ的，合 域则是正在ＧＳＫ．３Ｂ的Ｃ端而Ａｘｉｎ与ＧＳＫ．３Ｂ的结，３１３的贯串域思吻合同ＦＲＡＴ与ＧＳＫ－，可以逐鹿贯串ＧＳＫ．３Ｄｐ９１这评释Ａｘｉｎ和ＦＲＡＴ 有。ｍｅｎｉｎ的降解经过中起着至闭紧急的影响ＧＳＫ一３０ｃ和ＧＳＫ－３１３正在ｐ．ｃ。不生存的情状下正在Ｗｎｔ信 号，化ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的影响ＧＳＫ．３ｐ起着机闭酶磷酸，ｎ降 解前的闭节化妆这是Ｄ．ｃａｔｅｎｉ。致Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ的极度调控 最终导致癌症的产生要是ＳＫ．３ｐ不行与ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ相影响将导。胞的Ｓ期正在平常细，Ｋ．３Ｂ转化到细胞核会有－ｄ个人的ＧＳ，效力目前还不领会这种转化的生物学。这样假使，ｙ ｅｆｆｕｓｉｏｎ ｌｙｍｐｈｏｍａＰＥＬ）正在良多癌结构如原发渗透性淋 巴瘤（ｐｒｉｍａｒ，ｓｉ’Ｓｓａｒｃｏｍａ卡博西斯赘瘤（Ｋａｐｏ，） 中ＫＳ， ｌａｔｅｎｃｙ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｔｉｇｅｎ拥有Ａｘｉｎ／ＧＳＫ．３ｐ贯串域同源序列的细胞潜匿相干的核抗原（ｔｈｅ，核内裁减甚 至消费完细胞质中的ＧＳＫ．３ｐＬＡＮＡ）可能将ＧＳＫ－３１３滞留正在细胞，节ＴＣＦ．和ＬＥＦ．介导的转录安静ｐ．ｃａｔｅｌＩｉｎ从而调。被酪卵白激酶（ｃａｓｅｉｎｋｉｎａｓｅｌｅｔＧＳＫ－３１３正在磷酸化其底物时其底物必须先，其余的位点先磷酸化ＣＫＩｏｃ＿） 正在；此因，能是要ＣＫｌｃｔ的助理才 能落成鲥５２ＪＧＳＫ．３ｐ降解ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的功。白的影响磷酸化ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ夕ｂＧＳＫ．３ｐ除了通过Ａｘｉｎ构架蛋，ｎ来安排Ａｘｉｎ的安静性它还能通过磷酸化 Ａｘｉ。能的磷酸化位点： ＳＡＮＤＳＥＱＱＳ３３０Ａｘｉｎ自身有好几个ＧＳＫ．３１３ｎ－Ｉ＂，ＳＬＴ３４１ＳＤＡＤＴＬ，氨酸位点突变 第一章绪言 成丙氨酸时和ＳＬＴＤＳ３４３：当这些丝氨酸或苏，化秤谌大大低落ａｘｉｎ的磷酸。剂ＬｉＣｌ解决细胞 后当用ＧＳＫ－３ｐ的箝制，安静性低沉Ａｘｉｎ的；酸能逆转ＬｉＣＩ的影响用磷酸酶箝制剂软海绵，磷酸化的Ａｘｉｎ更安静【６１１这也评释 磷酸化的Ａｘｉｎ比非。ｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ２Ａ１．１．４．１．２．４卵白磷酸酶（ｐ，一种丝／苏氨酸去磷酸酶ＰＰ２Ａ） ＰＰ２Ａ是，质脱磷酸能使卵白，细胞周期、信号传导等经过中均起到紧急影响正在新陈代谢、ＤＮＡ复 制、转录、翻译、。、一个催化亚基Ｃ和一个安排亚基Ｂ组成ＰＰ２Ａ全酶通 常由一个机闭亚基Ａ， 架卵白连结Ｂ和Ｃ此中Ａ亚基行为支，２Ａ的催化活性Ｃ亚基独具ＰＰ，异性、亚细胞定位以及全酶的催化活性而安排亚基Ｂ决意了ＰＰ２Ａ的特 ，节影响【６２１起到紧急的调。以安排亚基Ｂ与底物的特异性贯串为条件ＰＰ２Ａ全酶的 大大都生物学效力是，使底物去磷酸化竣工再由催化亚基Ｃ 。族一Ｂ、Ｂ５６、ＰＲ７２ 和ＰＲ９３目前仍旧察觉了４种分歧的安排亚基Ｂ家。或是肖似底物的分歧位点去 磷酸化【６３】分歧的ＰＰ２ＡＺ聚体对分歧底物的去磷酸化。降解复 合物中可能和ＡＰＣ彼此影响也能与Ａｘｉｎ的氨基酸５０８．７１２机闭域变成物理性结 合探讨察觉ＰＰ２Ａ的催化亚基不光能正在Ａｘｉｎ．ＡＰＣ．．ＧＳＫ３．ｐ—ｐ．．ｃａｔｅｎｉｎ的，２９８．５０６）相影响【［６４６５】］同时也可以与Ａｘｉｎ的另一机闭域（ａａ，酸化低落Ａｘｉｎ的安静性从而低落Ａｘｉｎ 的磷，信号转导中起正调控 影响［６６１这评释ＰＰ２Ａ的催化亚基正在Ｗｎｔ。ｎｉｎ从而削弱ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ的信号Ｂ５６表达的填补则会裁减ｐ．ｃａｔｅ。降解复合物之间的生物学效力至今还不领会ＰＰ２Ａ＝聚 体和Ｄ．ｃａｔｅｎｉｎ。ＰＰ２Ａ能有探讨报道将 uNTgt影响野生型Axin效力的分子机Fused幼鼠天然突变体AxinltF理